产品编号 :HM66706HRP
价格/规格 :1650.00 / 6ml 即用型 (即用型不需稀释,一抗已用多聚过氧化物酶标记不需二抗系统此为一步法)
技术指标 : 小鼠抗人,大鼠,小鼠,兔,猫,狗,禽类等单克隆抗体 4D11
适用组织 : 冰冻/石蜡切片/细胞
适用方法 : Affinity Purification (For conjugation, order Ab without BSA),Immunofluorescence , Western Blotting (Not verified)
产品说明 : Insertion of a 6-Histidine tag creates a stable fusion product hat does not interfere with the bioactivity of the protein or with the biodistribution of the His-tagged product. Such proteins are purified by immobilized metal ion affinity chromatography which makes use of its high affinity for transition metal ion. Ab-1 recognizes hexa-histidine epitope both at the N- or C-terminus. Ab-1 can be used as a molecular handle for any recombinant protein expressed in a vector which contains a six histidine stretch adjacent to the restriction sites Bam H1 which is a common motif in several commercially available expression plasmids.
一步法实验步骤(适用于# HM66706HRP)使用说明(推荐): 一抗直接标记多聚HRP 分子可放大25 倍显色信号
1、石蜡切片常规脱蜡复水:二甲苯三次,10 分钟/次无水乙醇10 分钟一次90%乙醇10 分钟一次 80%乙醇10 分钟一次0.01M PBS 冲洗三次至PH 6.0 0.1M 枸橼酸缓冲液配制的0.1%0 曲拉通X-100 溶液中浸泡5-15 分钟.PBS 洗涤3 次每次3 分钟。后做抗原修复注意:组织修复参考组织处理。冰冻切片/细胞爬片/细胞涂片:置PH 6.0 0.1M 枸橼酸缓冲液配制的0.1%0 曲拉通X-100 溶液中浸泡5-15 分钟.PBS 洗涤3 次每次3 分钟
2、石蜡或冰冻切片非特异性过氧化氢的封闭和阻断:滴加封 闭液I,覆盖组织, 室温孵育10-15 分钟.倾去。0.01mol PBS 洗一次。
3、滴加特异性多聚酶标记的一抗体: 覆盖组织室温湿盒孵育 4℃ 过夜或37 度6090 分钟. PBS 洗涤3 次每次3 分钟。
4、滴加DAB 剂覆盖组织室温避光显色3-5 分钟或更长时间, 至显色水洗终止反应。
5、苏木素复染2-3 分钟,水洗终止反应,分化液分化后用蓝 化液蓝化5 分钟。
6、脱水 (80>90;%>无水乙醇一次>二甲苯脱水三次) ,中性 树胶封片, 镜下观察结果。